脾臟在充當(dāng)著血液的過(guò)濾器從而監(jiān)測(cè)通過(guò)血液傳播的病原體以及有缺陷的紅細(xì)胞。脾臟結(jié)構(gòu)上被分為富含淋巴細(xì)胞的白髓和充滿紅細(xì)胞與巨噬細(xì)胞的紅髓。白髓中央主要由T細(xì)胞區(qū)構(gòu)成，周圍被B細(xì)胞濾泡區(qū)包圍，并且通過(guò)邊緣區(qū)（Marginal Zone，MZ）與紅髓分離。大部分進(jìn)入脾臟的血液首先到達(dá)MZ，這就意味著系統(tǒng)傳播的血源性抗原或者病原體最開(kāi)始都會(huì)在MZ被過(guò)濾。邊緣區(qū)中富含邊緣區(qū)B細(xì)胞（MZ B cells），它們可以識(shí)別細(xì)菌膜上存在的抗原物質(zhì)并快速產(chǎn)生漿細(xì)胞，此特性有助于提供針對(duì)血源性病原體的早期抗體。在脾臟中，白髓巨噬細(xì)胞主要參與免疫應(yīng)答的調(diào)節(jié)，紅髓巨噬細(xì)胞在清除衰老紅細(xì)胞等血液成分方面發(fā)揮作用，邊緣區(qū)巨噬細(xì)胞（MZM：marginal zone macrophages）可以捕獲和處理血液中的抗原，嗜金屬巨噬細(xì)胞（MMM：marginal metallophilic macrophages ）可能與金屬離子的代謝或解毒等過(guò)程有關(guān)。這些不同類型的脾臟巨噬細(xì)胞共同協(xié)作，維持脾臟作為重要免疫器官的功能。

脾臟中的組織駐留巨噬細(xì)胞（包括紅漿和白漿巨噬細(xì)胞，邊緣區(qū)巨噬細(xì)胞（MZM）和邊緣區(qū)嗜金屬巨噬細(xì)胞（MMM））具有高度異質(zhì)性。通常通過(guò)免疫組織化學(xué)基于定位，形態(tài)和膜抗原表達(dá)來(lái)識(shí)別脾中的每個(gè)巨噬細(xì)胞亞群。已有研究表明，MZM 在使用荷蘭巨噬細(xì)胞清除劑Clodronate Liposomes氯膦酸鹽脂質(zhì)體，其改變了凋亡細(xì)胞的空間定位，這些細(xì)胞積累在淋巴濾泡的 T 細(xì)胞區(qū)域。MZM 清除還增強(qiáng)了紅髓（CD68(+)F4/80(+)）巨噬細(xì)胞對(duì)凋亡細(xì)胞的吞噬作用，其表達(dá)了增加的 CD86、MHCII 和 CCR7。MZM 清除/耗竭導(dǎo)致促炎細(xì)胞因子的產(chǎn)生增加和淋巴細(xì)胞對(duì)凋亡細(xì)胞抗原的反應(yīng)性增強(qiáng)。由于脾臟巨噬細(xì)胞的高度異質(zhì)性，以及我們使用Clodronate Liposomes氯膦酸鹽脂質(zhì)體的注射方式，劑量，檢測(cè)時(shí)間點(diǎn)和檢測(cè)手段，以及流式選擇的Marker，甚至脾臟的單個(gè)細(xì)胞懸液的制備方式，都使的文獻(xiàn)數(shù)據(jù)僅僅是參考，具體還得用自己的數(shù)據(jù)聯(lián)合對(duì)照自圓其說(shuō)。

邊緣區(qū)巨噬細(xì)胞（MZM：marginal zone macrophages）主要由兩層巨噬細(xì)胞組成。內(nèi)層的巨噬細(xì)胞表達(dá)CD169，外層巨噬細(xì)胞表達(dá)SIGNR1和MARCO。當(dāng)我們使用荷蘭巨噬細(xì)胞清除劑Clodronate Liposomes氯膦酸鹽脂質(zhì)體（貨號(hào)CP-005-005）清除邊緣區(qū)巨噬細(xì)胞時(shí)，氯膦酸二鈉脂質(zhì)體Clodronate Liposomes清除脾臟邊緣區(qū)巨噬細(xì)胞解決方案可以參考如下圖片數(shù)據(jù)：

PBS-L: PBS Liposomes,貨號(hào)：P-005。Col-L: Clodronate Liposomes, 貨號(hào)：C-005。建議訂套裝，貨號(hào)CP-005-005

如圖，脾臟 MZM 由兩層巨噬細(xì)胞組成。外層表達(dá)受體 SIGNR1 和 MARCO，內(nèi)層表達(dá)受體 CD169。在前 24 小時(shí)內(nèi)，Clodronate Liposomes（Clo-L） 給藥對(duì)脾巨噬細(xì)胞影響不大，但在處理后 48 小時(shí)清除了大量 F4/80 ⁺ 紅髓細(xì)胞，耗竭了 SIGNR ⁺ 巨噬細(xì)胞，部分耗竭了 CD169 ⁺ MZ 巨噬細(xì)胞。注射方式：靜脈注射。劑量：200ul，也就是1mg。濃度是5mg/ml。